0

A Comprehensive Assessment of Biological Function of Newly Sequenced 'yutK' Gene in Basillus Subtilis

eBook

Erschienen am 05.08.2013, Auflage: 1/2013
CHF 44,00
(inkl. MwSt.)

Download

E-Book Download
Bibliografische Daten
ISBN/EAN: 9783656474678
Umfang: 149 S., 2.84 MB
E-Book
Format: PDF
DRM: Nicht vorhanden

Beschreibung

Dette projekt handler om yutK genet i Bacillus subtilis. Formålet med projektet var at undersøge den konstruerede WOT 22 (yutK :: pMUTIN4) stamme, som var blevet fremstillet i forbindelse med mit 15 points forprojekt. Denne stamme skulle analyseres og sammenlignes med Bacillus subtilis vildtype stammen. Der var blevet konstrueret 10 kontrol stammer, alle indeholdende en transkriptionel fusion mellem et fragment fra yutK indeholdende dettes operator -/ promoter område og lacZ, indsat i amyE. lacZ genet koder for beta-galactosidase. Alle disse stammer samt WOT 22 blev analyseret ved fænotypisk ekspressions undersøgelser, og der blev målt beta-galactosidase-aktivitet af yutK stammen (WOT 22) og kontrol stammen WOT 268(3) i 7 punkter på vækstkurven. Resultaterne viste, at yutK stammen (WOT 22) havde h.h.v. 2,45, 0,79 og 0,90 fold lavere beta-galactosidase aktivitet fra eksponentiel til stationær fase, når stammen voksede på flydende h.h.v. LB medie og minimal medie med h.h.v. glucose og succinate samt glutamate tilsat. Imens kontrol stammen WOT 268(3) havde h.h.v. 8,12, 1,47 og 2,06 fold lavere beta-galactosidase aktivitet fra eksponentiel til stationær fase, når stammen voksede på flydende h.h.v. LB medie og minimal medie med h.h.v. glucose og succinate samt glutamate tilsat. Resultaterne i dette studie viste, at vildtypen blev hæmmet, når yutK genet blev slået ud, og at yutK genet var omvendt catabolite repression.Sekventering af B. subtilis PCR-produkter, som var opformeret fra kontrol stammerne WOT 268(3) og -(8) viste, at PCR-produktet fra WOT 268(3) stammen ikke indeholdte nogen afvigelser fra den ønskede sekvens. Hvorimod PCR-produktet fra WOT 268(8) stammen havde 2 afvigelser i den observerede sekvens i forhold til den forventede. Resultatet af uptake-forsøgene indikerede, at yutK genet transporterede ikke nukleosider ind i B. subtilis celler.

Informationen zu E-Books

Individuelle Erläuterung zu E-Books