Diese erste deutschsprachige Übersicht beschreibt praxisnah alle verfügbaren und in der europäischen Pharmakopöe aufgenommenen Nachweisverfahren für bakterielle Endotoxine und andere Pyrogene. Jede Methode wird ausführlich beschrieben und anhand von Praxisbeispielen einschließlich der produktbezogenen Methodenvalidierung präsentiert. Neueste Erkenntnisse zur Maskierung von Endotoxinen und dem LER (low endotoxin recovery)-Effekt sowie neuentwickelte Methoden zur Endotoxinbestimmung mittels rekombinanter Testsysteme werden vorgestellt. Eine Beschreibung der notwendigen Ausrüstung sowie der hauptsächlichen Einsatzgebiete runden dieses Buch ab.
Dr. Michael Rieth leitete zwischen 1999 und 2014 die Biologische Qualitätsprüfung der Merck KGaA in Darmstadt. Nach seiner Promotion am Institut für Mikrobiologie an der Georg-August-Universität zu Göttingen im Jahre 1987 war er zunächst als wissenschaftlicher Assistent am Universitätsklinikum Göttingen und an der Universität Oldenburg tätig. 1988 wechselte er in die pharmazeutische Industrie. Seine Karriere führte ihn über die biosyn Arzneimittel GmbH in Stuttgart, die Nordmark Arzneimittel GmbH in Uetersen und Schering AG in Berlin zu Merck KGaA, wo er zuletzt im Bereich Global Regulatory Affairs arbeitete. Seit 2020 ist er im Ruhestand. Neben der Mitarbeit in zahlreichen Fachausschüssen ist er in der Fort- und Weiterbildung auf dem Gebiet der pharmazeutischen Mikrobiologie aktiv. Für sein 2012 erschienenes Buch "Pharmazeutische Mikrobiologie" wurde er 2013 mit dem Wallhäußer-Preis ausgezeichnet. 2016 veröffentlichte Dr. Rieth zusammen mit Dr. Norbert Krämer das Fachbuch "Hygiene in der Arzneimittelproduktion".
Vorwort IX
1 Historisches zu Pyrogenen und Endotoxinen1
1.1 Chronologie ab 19. Jahrhundert 2
1.2 Fieber 5
1.3 Pyrogene 5
1.4 Endotoxine, Exotoxine und Enterotoxine 5
Literatur 9
2 Nachweis von fiebererzeugenden Substanzen11
2.1 Neun Augen, zehn Beine, zwolf Zangen: ein Schwertschwanz 20
2.2 Tests auf Endotoxine 24
Literatur 27
3 Prüfung auf Pyrogene (Ph. Eur. 2.6.8)29
Literatur 34
4 Prüfung auf Bakterienendotoxine (Ph. Eur. 2.6.14 und 5.1.10)35
4.1 Rekonstitution des Lysats 35
4.2 Referenzstandards 35
4.3 Kontrollen wahrend des Tests 38
4.4 Bestatigung der Lysatempfindlichkeit durch das Labor 38
4.5 Prufung eines Produkts 38
4.5.1 Limittest (Methode A) 38
4.5.2 Quantitativer Test (Methode B) 39
4.5.3 Turbidimetrischer Test 40
4.5.4 Chromogener Test 42
4.6 Eliminierung von Storfaktoren und Interferenzen 44
4.7 BET mit oligen Substanzen 51
Literatur 53
5 Alternative Verfahren55
5.1 Prufung auf Monozytenaktivierung (Ph. Eur. 2.6.30) 56
5.2 Monocyte-activation test for vaccines containing inherently pyrogenic components 59
5.3 Bakterieller Endotoxintest mit rFC (Ph. Eur. 2.6.32) 60
5.4 Bakterieller Endotoxintestmit drei rekombinanten Enzymen 66
5.5 Weitere Verfahren 68
Literatur 68
6 LER-Effekt (low endotoxin recovery, LER)71
6.1 Entdeckung des LER-Effekts und der Maskierung 71
6.2 Demaskierung 75
Literatur 76
7 Vorkommen und Nachweis von Glucanen77
Literatur 83
8 Probenzug und Probenvorbereitung85
8.1 Schulung zum Musterzug 87
8.2 Probenvorbereitung 88
8.3 Prufung vonWasserproben 88
8.3.1 Wasser zum Verdunnen konzentrierter Hamodialyselosungen 88
8.3.2 Wasser fur Injektionszwecke (WfI) 88
8.3.3 Wasser nach USP 89
8.3.4 LAL ReagentWater (LRW) 90
8.3.5 VE-Wasser 90
8.3.6 Trinkwasser 91
8.3.7 Suswasser 91
8.4 Prufung von Primarpackmitteln 91
8.4.1 Prufung von Stopfen 93
8.4.2 Prufung von Spritzen und Injektionsnadeln 94
8.5 Prufung vonMedizinprodukten 95
Literatur 99
9 Methodenvalidierung101
9.1 Validierung der Prufung auf Bakterienendotoxine 101
9.2 Validierung des bakteriellen Endotoxintestsmit rFC 119
9.3 Validierung der Prufung auf Monozytenaktivierung 121
Literatur 121
10 Eliminierung und Inaktivierung von Endotoxinen123
Literatur 134
11 Ausrüstung135
11.1 Das Pruflabor 135
11.2 Automationsmoglichkeiten 136
11.3 Qualifizierung und Kalibrierung der Messgerate 139
Literatur 144
12 Vorgehensweisen beiOut-of-Specification-Ergebnissen145
12.1 OOS beim BET 147
12.2 OOS beim Pyrogentest 151
Literatur 153
13 Weitere Einsatzgebiete der Prüfung auf Bakterienendotoxine155
13.1 Monitoring des Umfelds 155
13.2 Reinigungsvalidierung 156
13.3 Untersuchung von Biofilmen 157
13.4 Korrelieren Endotoxineinheiten zur Keimzahl gramnegativer Bakterien? 160
Literatur 161
Anhang: Formeln 163
Abkürzungen 165
Weiterführende Literatur 169
Stichwortverzeichnis 181